|
|
Příprava potravinových doplňků na bázi vzácných druhů hub
Vetchá, Vendula ; Uhlířová, Renata (oponent) ; Hoová, Julie (vedoucí práce)
Tato diplomová práce se zabývá charakterizací nutričně významných látek ve vybraných vzorcích vzácných druhů hub, konkrétně lesklokorky lesklé a korálovce ježatého. Dále se věnuje biologickému vlivu vybraných vzácných hub na lidské buněčné linie HaCaT a Caco-2, sleduje produkci prozánětlivých cytokinů IL-6 a IL-8 imortalizovanými keratinocyty a buňkami karcinomu tlustého střeva po expozici vodných extraktů připravených z práškové formy hub. Teoretická část diplomové práce se věnuje charakteristice hub z hlediska morfologických znaků a jejich taxonomickému zařazení do živé říše. Dále studuje účinky jedlých a léčivých druhů hub a detailně popisuje medicinální houby, jako lesklokorku lesklou, houževnatce jedlého, trsnatce lupenitého, penízovku sametonohou, korálovce ježatého a hlívu ústřičnou, informuje o jejich účincích, využití a možnostech aplikace v potravinářství a farmacii. Zmiňuje možné negativní účinky hub na zdraví konzumentů. Uvádí metody zpracování hub a jejich využití v potravinářském průmyslu, dále se zaměřuje na možnosti testování toxicity in vitro a poskytuje stručný přehled běžně používaných testů cytotoxicity jako je MTT test či LDH test. Experimentální část diplomové práce se zabývá přípravou vodných extraktů z houbových prášků a jejich charakterizací z hlediska nutričních a biologicky aktivních látek. Pomocí HPLC analýzy sleduje obsah lipofilních látek a vitaminu C v jednotlivých vzorcích hub. Pro potvrzení biologického účinku na lidské zdraví byl proveden antimikrobiální test za použití čtyř modelových mikroorganismů a testy cytotoxicity na dvou lidských buněčných liniích. Nakonec byla provedena senzorická analýza instantní zeleninové polévky obohacené o přídavek houbového prášku. U analyzovaných práškových extraktů z houby lesklokorky lesklé byly potvrzeny biologické účinky, a to především jejich cytotoxický účinek na nádorové buňky epitelu tlustého střeva. Aplikace do potravinářství není v případě reishi snadná, a to kvůli triterpenoidům, které způsobují hořkou chuť. Naopak v případě korálovce ježatého byla pomocí testů cytotoxicity potvrzena bezpečnost použití v potravinářství. Výsledky senzorické analýzy prokázaly pozitivní vliv korálovce ježatého na chuťový profil instantních zeleninových polévek.
|
|
|
Vývoj ligandů konstitutivního androstanového receptoru (CAR)
Dušek, Jan ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Hudeček, Jiří (oponent) ; Chládek, Jaroslav (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát Mgr. Jan Dušek Školitel Prof. PharmDr. Petr Pávek, Ph.D. Název disertační práce Vývoj nových ligandů konstitutivního androstanového receptoru (CAR) Konstitutivní androstanový receptor (CAR) je dnes považován za etablovaný nukleární receptor, který reguluje expresi několika klíčových enzymů cytochromu P450, především CYP2B6 a CYP3A4. V poslední době se ukazuje, že CAR má také klíčovou úlohu v regulaci endogenního metabolismu glukózy, lipidů, cholesterolu nebo žlučových kyselin. Současně je tomuto receptoru připisován proproliferativní účinek na lidské hepatocyty a protektivní účinky proti toxickéhu nebo dietárnímu poškození jaterního parenchymu. S ohledem na možné terapeutické využití CAR receptoru jsou proto intenzivně studovány jeho terapeutické možnosti. Bohužel v současnosti známé ligandy lidského nebo myšího CAR receptoru jsou málo selektivní nebo nepřímé. Cílem mé doktorské práce bylo najít nové ligandy myšího a lidského CAR receptoru, které by nám umožnili detailnější studium tohoto receptoru.
|
|
|
In vitro a ex vivo studium lékových interakcí antiretrovirálních látek na střevních ATP-vázajících lékových transportérech
Jahodová, Michaela ; Červený, Lukáš (vedoucí práce) ; Vokřál, Ivan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Bc. Michaela Jahodová Školitel: PharmDr. Lukáš Červený, Ph.D. Název diplomové práce: In vitro a ex vivo studium lékových interakcí antiretrovirálních látek na střevních ATP-vázajících lékových transportérech Absorpce perorálně podaných léčiv probíhá zejména ve střevě, kde může být ovlivněna aktivitou lékových ABC transportérů lokalizovaných na apikální membráně střevního epitelu. Studium lékových interakcí na střevních ABC transportérech je nezbytné pro zajištění efektivní a bezpečné farmakoterapie. Testování obousměrného transportu na buňkách Caco-2 je obecně preferovanou metodou pro in vitro hodnocení substrátů a inhibitorů ABC transportérů. Nevýhody modelu Caco-2 zvyšují nutnost a potřebu zavádění nových modelů. Velký potenciál má zapojení ex vivo metodik na lidském či potkaním střevě. Cílem práce bylo tedy zavedení in vitro metodiky využívající monovrstvu buněk Caco-2 a ex vivo metodiky ultratenkých potkaních intestinálních řezů. Metodou obousměrného transportu jsme analyzovali lékové interakce modelového substrátu P-gp a BCRP Rhodaminu 123 (RHD123) a klinicky využívaného antiretrovirotika (ARV) tenofoviru disoproxil fumarátu (TDF) s vybranými navrženými inhibitory P-gp/BCRP ze...
|
|
|
Vývoj ligandů konstitutivního androstanového receptoru (CAR)
Dušek, Jan ; Pávek, Petr (vedoucí práce) ; Hudeček, Jiří (oponent) ; Chládek, Jaroslav (oponent)
Univerzita Karlova, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra farmakologie a toxikologie Kandidát Mgr. Jan Dušek Školitel Prof. PharmDr. Petr Pávek, Ph.D. Název disertační práce Vývoj nových ligandů konstitutivního androstanového receptoru (CAR) Konstitutivní androstanový receptor (CAR) je dnes považován za etablovaný nukleární receptor, který reguluje expresi několika klíčových enzymů cytochromu P450, především CYP2B6 a CYP3A4. V poslední době se ukazuje, že CAR má také klíčovou úlohu v regulaci endogenního metabolismu glukózy, lipidů, cholesterolu nebo žlučových kyselin. Současně je tomuto receptoru připisován proproliferativní účinek na lidské hepatocyty a protektivní účinky proti toxickéhu nebo dietárnímu poškození jaterního parenchymu. S ohledem na možné terapeutické využití CAR receptoru jsou proto intenzivně studovány jeho terapeutické možnosti. Bohužel v současnosti známé ligandy lidského nebo myšího CAR receptoru jsou málo selektivní nebo nepřímé. Cílem mé doktorské práce bylo najít nové ligandy myšího a lidského CAR receptoru, které by nám umožnili detailnější studium tohoto receptoru.
|
|
|
In vitro transport abakaviru přes monovrstvu Caco-2 buněkꓼ interakce s etravirinem a rilpivirinem
Mlčochová, Alice ; Čečková, Martina (vedoucí práce) ; Červený, Lukáš (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Alice Mlčochová Školitel: PharmDr. Martina Čečková, Ph.D. Název diplomové práce: In vitro transport abakaviru přes monovrstvu Caco-2 buněkꓼ interakce s etravirinem a rilpivirinem. Abakavir patří do skupiny nukleosidových inhibitorů reverzní transkriptázy (NRTI) tvořících základní složku kombinované antiretrovirální terapie HIV-pozitivních pacientů [1]. Etravirin a rilpivirin jsou antiretrovirotika patřící mezi novější nenukleosidové inhibitory reverzní transkriptázy (NNRTI), které se v rámci cART podávají společně s NRTI. Na ATP závislé transportéry, tzv. ABC transportéry, jsou schopné ovlivňovat farmakokinetické vlastnosti léčiv a způsobovat lékové interakce na úrovni absorpce, distribuce a exkrece. P-glykoprotein (Pgp, ABCB1) a BCRP (ABCG2) patří mezi klinicky nejvýznamnější zástupce se schopností navozovat lékové interakce. Cílem této práce bylo zavedení metody studia absorpce léčiv s použitím monovrstvy lidské intestinální buněčné linie Caco-2, jejíž integrita byla ověřena pomocí hodnocení TEER (transepiteliální elektrické rezistence). Tento model byl pak dále použit při transportních studiích s abakavirem. Ty prokázaly asymetrii v přestupu abakaviru přes Caco-2 monovrstvu v...
|
|
|
In vitro a ex vivo studium lékových interakcí antiretrovirálních látek na střevních ATP-vázajících lékových transportérech
Jahodová, Michaela ; Červený, Lukáš (vedoucí práce) ; Vokřál, Ivan (oponent)
Univerzita Karlova v Praze Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra farmakologie a toxikologie Studentka: Bc. Michaela Jahodová Školitel: PharmDr. Lukáš Červený, Ph.D. Název diplomové práce: In vitro a ex vivo studium lékových interakcí antiretrovirálních látek na střevních ATP-vázajících lékových transportérech Absorpce perorálně podaných léčiv probíhá zejména ve střevě, kde může být ovlivněna aktivitou lékových ABC transportérů lokalizovaných na apikální membráně střevního epitelu. Studium lékových interakcí na střevních ABC transportérech je nezbytné pro zajištění efektivní a bezpečné farmakoterapie. Testování obousměrného transportu na buňkách Caco-2 je obecně preferovanou metodou pro in vitro hodnocení substrátů a inhibitorů ABC transportérů. Nevýhody modelu Caco-2 zvyšují nutnost a potřebu zavádění nových modelů. Velký potenciál má zapojení ex vivo metodik na lidském či potkaním střevě. Cílem práce bylo tedy zavedení in vitro metodiky využívající monovrstvu buněk Caco-2 a ex vivo metodiky ultratenkých potkaních intestinálních řezů. Metodou obousměrného transportu jsme analyzovali lékové interakce modelového substrátu P-gp a BCRP Rhodaminu 123 (RHD123) a klinicky využívaného antiretrovirotika (ARV) tenofoviru disoproxil fumarátu (TDF) s vybranými navrženými inhibitory P-gp/BCRP ze...
|
|
|
Cell culture-based model for the evaluation of adhesive properties of probiotic bacteria
Theodorou, Vasiliki ; Havlík, Jaroslav (vedoucí práce) ; Tauchen, Jan (oponent)
Probiotické mikroorganismy, definovány jako živé mikroorganismy, které jsou při podání v přiměřeném množství zdraví přínosné pro hostitele, a jejich přilnavost a kolonizace střevního epitelu, jsou rozhodujícími faktory pro udržení probiotické účinnosti. Polyfenoly jsou velká a heterogenní skupina fytochemikálií, vyskytující se v potravinách rostlinného původu, jako je čaj, káva, víno, kakao, obilí, sója, ovoce a bobule. V posledním desetiletí se zvedl zájem o zdravotní přínosy potravinových rostlinných polyfenolů, které vyplývají z jejich potenciální schopnosti podporovat přilnavost probiotických bakterií v lidském střevním epitelu.
Účelem této studie bylo zkoumat účinek čtyř polyfenolů: isoquercitrin, phloretin, prokyanidin B2 a rutin na schopnost adheze dvou potenciálně probiotických kmenů (Lactobacillus casei, Lactobacillus gasseri) v in vitro modelu lidského střevního epitelu skládajícího se ze směsné kultury buněčných linií Caco-2 a sliz-produkujících HT29-MTX.
Adheze Lactobacillus casei se po ošetření směsné kultury buněčných linií s isoquercetrinem, phloretinem a rutiemu zvýšila o 49,76; 72,97; 63,66% v tomto pořadí, zatímco prokyanidin B2 potlačil adhezi o 20,25% ve srovnání s kontrolním vzorkem. Adheze Lactobacillus gasseri se po ošetření směsné kultury s isoquercetrinem, phloretinem, prokyanidinem B2 a rutinem zvýšila o 35,45; 31,28; 45,69; 25,01 % ve srovnání s kontrolním vzorkem.
|
|
|
In vitro anti-proliferační aktivita alkaloidů čeledi Amaryllidaceae
Panenková, Kristýna ; Havlík, Jaroslav (vedoucí práce) ; Jarošová, Veronika (oponent)
In vitro anti-proliferační aktivita alkaloidů čeledi Amaryllidaceae
Souhrn
Přírodní fytochemikálie jsou v současné době využívány při léčbě mnoha onemocnění. Nádorová onemocnění jsou právě jedním z nich a jsou řazena mezi ta nejčastější a zároveň nejzávažnější. Fytochemikálie v podobě cytostatik jsou využívány při chemoterapeutické léčbě nádorových onemocnění. Mezi cytostatika by do budoucna mohly být řazeny také některé alkaloidy čeledi Amaryllidaceae (Amarylkovité), jejichž testování na selektivní cytostatický účinek na nádorové buněčné linie kolorektálního karcinomu Caco-2 a HT-29 a na normální buněčné linie lidského střevního epitelu FHs 74 Int je předmětem této práce.
Celkem bylo testováno 17 alkaloidů izolovaných z rostlin Chlidanthus fragrans, Zephyranthes robusta a Nerine bowdenii. Významnou anti-proliferační aktivitu prokázaly zejména alkaloidy z rostliny Zephyranthes robusta a to konkrétně haemanthamin
s hodnotami IC50 = 0,99 plus/minus 0,14 mikroM pro nádorové buňky Caco-2, 0,59 plus/minus 0,01 mikroM pro nádorové buňky HT-29 a 19,47 plus/minus 8,86 mikroM pro normální buňky FHs 74 Int, lykorin s hodnotami
IC50 = 0,99 plus/minus 0,08 mikroM pro nádorové buňky Caco-2, 1,2 plus/minus 0,01 mikroM pro nádorové buňky HT-29 a 22,68 plus/minus 0,09 mikroM pro normální buňky FHs 74 Int a haemanthidin s hodnotami
IC50 = 3,29 plus/minus 0,91 mikroM pro nádorové buňky Caco-2, 1,72 plus/minus 0,11 mikroM pro nádorové buňky
HT-29 a 11,63 plus/minus 0,86 mikroM pro normální buňky FHs 74 Int.
Z těchto výsledků je patrná selektivita vůči buněčným liniím kolorektálního karcinomu. Z tohoto důvodu jsou tyto testované alkaloidy vhodné k dalšímu testování a studiu jejich biologické aktivity vůči nádorovým buňkám v podmínkách in vitro i in vivo.
|
host ::
RSS.